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PC-LINK光裂解實驗成功關鍵

更新時間:2025-02-20   點擊次數:1018次

PC-LINK光裂解實驗是一種利用光敏基團在DNA探針中實現光控斷裂的技術。以下是該實驗的關鍵步驟和原理:

 1. DNA探針設計

- 光敏基團引入:在DNA探針的特定位置嵌入光敏基團(如PC-LINK),這些基團在光照下會發生斷裂。

- 探針功能:探針通常包含目標識別序列和報告基團(如熒光標記)。

2. 實驗步驟

- 雜交:將DNA探針與目標DNARNA雜交。

- 光照:用特定波長的光照射,激活光敏基團,導致探針在特定位置斷裂。

- 檢測:通過熒光或其他方法檢測斷裂產物,分析目標序列。

3. 應用

- 基因檢測:用于檢測特定基因序列。

- 分子生物學研究:研究DNA/RNA的相互作用和結構。

- 光控技術:實現光控的基因表達調控或分子開關。

 4.優點

-高特異性:光敏基團僅在光照下斷裂,減少非特異性反應。

- 時空控制:通過光照實現精確的時空控制。

 5. 注意事項

- 光敏基團選擇:需選擇合適的光敏基團和波長。

- 實驗條件優化:需優化光照時間和強度。

總結:PC-LINK光裂解實驗通過光敏基團實現DNA探針的光控斷裂,具有高特異性和時空控制能力,適用于基因檢測和分子生物學研究。

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PC-LINK光裂解連接步驟中,準確測量紫外燈的功率是確保實驗成功的關鍵。以下是詳細的步驟和方法:

使用紫外線輻照計

1.準備工作

選擇一款適合測量365nm波長的紫外線輻照計。

確保輻照計在使用前已經過校準,通常每年校準一次這里可以現在有測試設備的廠家,這樣可以不用額外采購輻照計(上海路陽/LUYOR品牌的提供測試,并且可以每年返廠免費測試一次)廠家提供測試可以忽略下面的步驟。

2.測量步驟

打開紫外燈,等待5分鐘直至其穩定。

將輻照計的光蓋打開,置于紫外燈中央下方垂直1米處。

讀取并記錄輻照計上的數值,該數值即為紫外燈的功率(通常以μW/cm2為單位)。

使用紫外線強度指示卡

1.準備工作

獲取適用于365nm波長的紫外線強度指示卡。

確保指示卡在使用前未過期,并妥善保存。

2. .測量步驟

打開紫外燈,等待5分鐘直至其穩定。

將指示卡置于紫外燈中央下方垂直1米處,有圖案的一面朝向燈管。

照射1分鐘后,立即將指示卡與標準色塊進行比較。

根據顏色變化確定紫外燈的輻照強度是否達到要求(新燈管≥90μW/cm2,舊燈管≥70μW/cm2)。

注意事項

· 定期校準:確保輻照計的準確性,定期進行校準。

· 環境條件:測量時應確保環境清潔,避免灰塵和油污影響測量結果。

· 安全防護:操作紫外燈時,務必佩戴防護眼鏡和手套,避免直接暴露于紫外光下。


上海路陽儀器有限公司
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